2015年湖北高考生物復(fù)習(xí)專項(xiàng)檢測(cè)：《基因工程與細(xì)胞工程》

湖北2015年高考生物復(fù)習(xí)專項(xiàng)檢測(cè)：《基因工程與細(xì)胞工程》

　　2015年湖北高考生正在努力備考中，湖北高考網(wǎng)整理了2015年湖北高考生物備考資料，希望對(duì)大家的復(fù)習(xí)有幫助！

　　一、選擇題(每題6分，共60分)

　　1.(2014·重慶卷)下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是(　　)

　　A.
②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與

　　B.
③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到
④的染色體上

　　C.
④的染色體上若含抗蟲基因，則
⑤就表現(xiàn)出抗蟲性狀

　　D.
⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異

　　解析　本題考查基因工程培育抗蟲植物的相關(guān)知識(shí)。通過對(duì)課本知識(shí)掌握，
②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，故A錯(cuò);
③侵染植物細(xì)胞后，不是重組質(zhì)粒而是目的基因整合到
④(植物細(xì)胞)的染色體上，故B錯(cuò);
④植物細(xì)胞的染色體上若含有抗蟲基因，但不一定能表達(dá)該基因，故
⑤不一定表現(xiàn)出抗蟲性狀，故C錯(cuò);
⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株已發(fā)生了可遺傳變異，故D正確。

　　答案　D

　　2.(2014·天津卷)為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過分子檢測(cè)的是(　　)

　　A.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選

　　B.產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選

　　C.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定

　　D.21三體綜合征的診斷

　　解析　根據(jù)受體菌是否對(duì)鏈霉素產(chǎn)生抗性進(jìn)行攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選，不需要分子檢測(cè)，A錯(cuò)誤;用特定選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才能獲得足夠多的能分泌抗人白細(xì)胞介素­8抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確;轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否具有抗蟲特性，需要做抗蟲的接種實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤;21三體綜合征可通過用顯微鏡直接觀察體細(xì)胞中的21號(hào)染色體數(shù)目的方法進(jìn)行檢測(cè)，D錯(cuò)誤。

　　答案　B

　　3.(2013·重慶卷)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是(　　)

　　A.
①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞

　　B.
②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成

　　C.
③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性

　　D.
④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群

　　解析　本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)。
①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞;
②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等，有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;
③同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性;
④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。

　　答案　D

　　4.(2013·江蘇卷)某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是(　　)

　　A.利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗

　　B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗

　　C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上

　　D.采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)

　　解析　本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不發(fā)生性狀分離，可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗，也可采用將幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗;花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物，利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗，其高度不育，且會(huì)發(fā)生性狀分離，因此B項(xiàng)方案不能選用。

　　答案　B

　　5.(2013·重慶卷)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)

　　A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害

　　B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞

　　C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控

　　D.生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑

　　解析　本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織中，因植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁，阻礙了細(xì)胞融合，所以此時(shí)加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，不能獲得染色體加倍的細(xì)胞;消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害;愈傷組織出芽是細(xì)胞分化的結(jié)果，而細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá);生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，生根時(shí)，培養(yǎng)基通常含有α-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑。故B項(xiàng)錯(cuò)誤。

　　答案　B

　　6.(2013·浙江卷)實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)

　　A.甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒

　　B.乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化

　　C.丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型

　　D.丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性

　　解析　本題主要考查了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。取小鼠皮膚組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒;通過胰蛋白酶消化皮膚組織可獲得皮膚細(xì)胞;丙過程為最初的傳代培養(yǎng)，得到的細(xì)胞大多具有正常二倍體核型;來源于多個(gè)細(xì)胞的非克隆培養(yǎng)所得到的細(xì)胞系具有異質(zhì)性，該實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞屬于非克隆培養(yǎng)，丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性。

　　答案　C

　　7.(2013·江蘇卷)小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是(雙選)(　　)

　　A.設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)不必考慮表達(dá)載體的序列

　　B.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列

　　C.PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶

　　D.一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞

　　解析　本題主要考查PCR技術(shù)的有關(guān)知識(shí)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)引物，但不需知道目的基因的全部序列，需要考慮載體的序列;因PCR反應(yīng)在高溫條件下進(jìn)行，故反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶;因某些目的基因編碼的產(chǎn)物需經(jīng)特殊的加工修飾過程，故一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞。

　　答案　BD

　　8.芥酸會(huì)降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(H和h，G和g)控制菜籽的芥酸含量，下圖是獲得低芥酸油菜新品種(HHGG)的技術(shù)路線。已知油菜單個(gè)花藥由花藥壁(2n)及大量花粉(n)等組分組成，這些組分的細(xì)胞都具有全能性。

　　據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)

　　A.
①、
②兩過程均需要植物激素來誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化

　　B.與
④過程相比，
③過程可能會(huì)產(chǎn)生二倍體再生植株

　　C.圖中三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株(HHGG)的效率最高

　　D.F1減數(shù)分裂時(shí)，H基因所在染色體會(huì)與G基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會(huì)

　　解析　
①
②兩過程是脫分化過程，培養(yǎng)基中需要加入生長素類和細(xì)胞分裂素類激素來誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化，故A項(xiàng)正確;
③過程是利用植物花藥離體培養(yǎng)獲得植株的過程，其中花藥壁細(xì)胞屬于正常的二倍體體細(xì)胞，由其獲得的植株為二倍體正常植株，
④過程是利用花粉粒離體培養(yǎng)獲得的，花粉細(xì)胞只有一個(gè)染色體組，由其獲得的植株為單倍體植株，故B項(xiàng)正確;圖中的三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)獲得的只有四種品種，比例為11:1:1，易篩選出所需品種，故C項(xiàng)正確;H、h和G、g分別是兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因，故兩者是位于非同源染色體上的，在減數(shù)分裂時(shí)，H和G基因所在的染色體不會(huì)發(fā)生聯(lián)會(huì)，故D項(xiàng)錯(cuò)誤。

　　答案　D

　　9.下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)

　　
①從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞　
②將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞

　　
③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)　
④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞　
⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞?、迯男∈蟾顾刑崛】贵w?、呃么偌?xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合

　　A.實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是
①
②⑦
⑤
④
③⑥

　　B.
③過程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過程稱為克隆

　　C.⑦過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖

　　D.利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選

　　解析　利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合，可獲得多種融合細(xì)胞。其中B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞不能無限增殖。

　　答案　C

　　10.(2014·杭州模擬)下圖示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是(　　)

　　A.
⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比
①植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)

　　B.
②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有有機(jī)物

　　C.
③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂

　　D.調(diào)節(jié)
④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官

　　解析　
⑤植株根尖細(xì)胞的全能性與
①植株根尖細(xì)胞相同;
②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑和有機(jī)物等;
③試管中的細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式為有絲分裂;調(diào)節(jié)
④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例，可誘導(dǎo)產(chǎn)生根或芽。

　　答案　D

　　二、簡(jiǎn)答題(共40分)

　　11.(10分)(2014·福建卷)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

　　(1)步驟
①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的________。

　　(2)步驟
②中，重組胚胎培養(yǎng)到________期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。

　　(3)步驟
③中，需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體?？梢愿鶕?jù)Rag2基因的________設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有________酶的酶切位點(diǎn)。

　　(4)為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的________，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。

　　解析　(1)核移植是把體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中。(2)囊胚期才有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。(3)可根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，要把目的基因和表達(dá)載體直接連接，目的基因和表達(dá)載體應(yīng)具有相同酶的酶切位點(diǎn)。(4)欲檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，需提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，進(jìn)行抗原—抗體雜交實(shí)驗(yàn)。

　　答案　(1)細(xì)胞核

　　(2)囊胚

　　(3)核苷酸序列　Hind Ⅲ和Pst Ⅰ

　　(4)蛋白質(zhì)

　　12.(15分)(2013·天津卷)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：

　　(1)過程
①所需的酶是______________。

　　(2)過程
②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

　　(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是______________。原生質(zhì)體經(jīng)過________再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。

　　(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和________植株的根尖，通過________、________、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

　　(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1～4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1～4中一定是雜種植株的有________。

　　(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行________接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。

　　解析　本題考查植物細(xì)胞工程、染色體變異的實(shí)驗(yàn)鑒定以及高抗性的雜種植株的篩選等相關(guān)知識(shí)。(1)去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。(2)葉肉細(xì)胞含有葉綠體，因此通過PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體，以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用，因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，使原生質(zhì)體處于等滲溶液中，以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要判斷染色體變異的類型，應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖，通過解離、漂洗、染色、制片等過程制成裝片，然后進(jìn)行顯微觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)根據(jù)兩親本的差異性條帶，可知再生植株1、2和4既有花椰菜的條帶，又有黑芥的條帶，因此再生植株1、2和4一定為雜種植株。(6)要篩選出高抗性的雜種植株，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的病原體接種實(shí)驗(yàn)，即接種黑腐病菌。

　　答案　(1)纖維素酶和果膠酶

　　(2)葉綠體

　　(3)保持原生質(zhì)體完整性　細(xì)胞壁

　　(4)雙親(或花椰菜和黑芥)　解離　漂洗

　　(5)1、2、4

　　(6)黑腐病菌

　　13.(15分)(2014·天津卷)嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β­葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗(yàn)：

　?、?利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶

　　(1)PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用______________________基因組DNA作模板。

　　(2)下圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入__________和__________不同限制酶的識(shí)別序列。

　　(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開_______________________________。

　　Ⅱ.溫度對(duì)BglB酶活性的影響

　　(4)據(jù)圖1、2可知，80℃保溫30分鐘后，BglB酶會(huì)__________;為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在________(單選)。

　　A.50℃ B.60℃

　　C.70℃ D.80℃

　?、?利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性

　　在PCR擴(kuò)增bglB基因的過程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過篩選，可獲得能表達(dá)出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。

　　(5)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌相比，上述育種技術(shù)獲取熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過程中________(多選)。

　　A.僅針對(duì)bglB基因進(jìn)行誘變

　　B.bglB基因產(chǎn)生了定向突變

　　C.bglB基因可快速累積突變

　　D.bglB基因突變不會(huì)導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變

　　解析　(1)BglB由嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生，故PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，應(yīng)選用嗜熱土壤芽孢桿菌基因組DNA作模板。(2)目的基因在與質(zhì)粒連接時(shí)，需連接在啟動(dòng)子和終止子之間，且所用限制酶不能破壞啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因，所以切割質(zhì)粒應(yīng)選用Nde I和BamH I兩種酶，則擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入Nde I和BamH I兩種酶的識(shí)別序列。(3)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌含有的bglB基因表達(dá)，合成了耐熱的纖維素酶，所以其獲得了降解纖維素的能力。(4)由圖2可知，80 ℃保溫30分鐘后，bglB酶的相對(duì)活性為0，所以此時(shí)該酶失活;由圖1可知：60 ℃～70 ℃時(shí)bglB酶的相對(duì)活性最高。70 ℃時(shí)，該酶活性易降低，所以為高效利用bglB酶降解纖維素應(yīng)最好將溫度控制在60 ℃。(5)在PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)加入誘變劑僅對(duì)該基因進(jìn)行誘變，可快速累積突變，但誘發(fā)基因突變時(shí)，突變?nèi)允遣欢ㄏ虻?，且突變的結(jié)果可以改變酶中氨基酸的數(shù)目。若用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌，可誘發(fā)其內(nèi)的任一基因突變，不能快速積累bglB基因突變，故A、C正確，B、D錯(cuò)誤。

　　答案　(1)嗜熱土壤芽桿菌

　　(2)Nde I　BamH I

　　(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的bglB酶

　　(4)失活　B

　　(5)A、C